Para obter uma contagem adequada para a quantidade de bactérias totais exigidas pelo MAPA na IN76 e IN77, para tanque de expansão (300.000 UFC/ml) e silos (900.000/ml), o método mais indicado é fazer a diluição seriada até 10e-4. Nessa diluição o número de UFC não deve passar de 30 para tanques e 90 para silos.
Desde que o MAPA publicou em novembro de 2018 as instruções normativas n° 76 e n° 77, é importante no produtor rural, o monitoramento é feito através da coleta de amostras de leite em tanques de expansão e o valor de 300.000 UFC/ml representa a quantidade máxima de bactérias totais permitida na média trimestral. Nas usinas de beneficiamentos (laticínios) o leite pode ser estocado e o valor de UFC/ml não deve ultrapassar 900.000 na média trimestral.
Para fazer a contagem de bactérias totais no leite cru, indicamos o uso da técnica de diluição seriada, que consiste na diluição na ordem de 10 vezes entre cada etapa. Para chegar em uma contagem de UFC para comparar com os valores estipulados pelas IN76 e IN77, o procedimento deve ser iniciado com uma amostra de 10 ml de leite cru na temperatura descrita nas INs (4°C). lembrando de coletar a amostra de forma asséptica. Coloque os 10,0 ml do leite em 90,0 ml de água peptonada tamponada estéril (APT), nesse caso indicamos o uso do produto Flip-Top 3M que já vem devidamente preparado e pronto para o uso. Essa primeira etapa representa a diluição 10e-1. Os passos seguintes são transferir 1,0 ml dessa solução para uma nova APT com 9,0 ml (10e-2) e repetir esse processo por mais 2 vezes até termos a diluição final de 10e-4. O último passo é transferir 1,0 ml da diluição 10e-4 para um método de cultivo de bactérias totais, como o Petrifilm 3M AC e incubar pelo tempo e temperatura adequados.
Na solução que foi diluída 10 mil vezes (10e-4) a contagem máxima de UFC/ml deve ser de 30, para produtor rural, o que equivale a 300.000 e de 90 UFC/ml para estocagem no laticínio, representando 900.000. Assim, as quantidades de UFC acima de 31 e de 91, para produtor rural e laticínio respectivamente, representam valores reprovados.
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